- 李桐;刘筱羽;王晓宇;骆敏;张知云;宿杨帅;景向红;
目的:观察功能性便秘、腹泻模型大鼠体表敏化区的分布特点,探究不同强度电针“天枢”对大鼠远端结肠运动的调节规律,明确肠神经系统(ENS)内不同亚型神经元在该调节效应中发挥的作用。方法:选用90只SPF级雄性SD大鼠,将其中15只大鼠随机分为正常组、便秘组、腹泻组,每组5只,观察粪便形态与含水量,以及尾静脉注射伊文氏蓝(EB)后大鼠体表EB渗出点的分布规律;18只大鼠随机分为正常+2 mA组、正常+4 mA组和正常+6 mA组,每组6只,利用生理信号采集分析系统记录、分析大鼠结肠蠕动波曲线下面积和平均幅值,观察不同强度电针“天枢”对远端结肠蠕动的即刻效应;30只大鼠随机分为正常组、便秘组、腹泻组、便秘+2 mA组、腹泻+6 mA组,每组6只,观察电针“天枢”对便秘和腹泻模型大鼠结肠动力紊乱的累积效应;12只大鼠随机分为便秘+2 mA组、腹泻+6 mA组,每组6只,用于观察电针“天枢”对便秘和腹泻模型大鼠结肠动力紊乱的即刻效应;15只大鼠随机分为正常组、便秘组、腹泻组、便秘+2 mA组、腹泻+6 mA组,每组3只,采用whole-mount染色检测ENS内囊泡乙酰胆碱转运体(VAChT)阳性神经元和一氧化氮合酶(n NOS)阳性神经元表达情况。根据分组,通过盐酸洛哌丁胺灌胃(10 mg·kg-1·d-1,连续7 d)建立功能性便秘模型,番泻叶药液灌胃(10 mL/kg,每天1次,连续2 d)建立功能性腹泻模型;于双侧“天枢”行不同强度(电流2、4、6 mA)电针干预,连续波,频率10 Hz。结果:与正常组比较,便秘组大鼠粪便数量减少,粪便含水量降低(P<0.001);腹泻组大鼠出现便溏症状,粪便含水量升高(P<0.001)。便秘组和腹泻组大鼠体表EB渗出点可见于T6-S2节段区域,且在T10-L3节段的下腹部和下背部较为集中。与电针前比较,正常+2 mA组、正常+4 mA组大鼠电针过程中远端结肠蠕动波曲线下面积和平均幅值升高(P<0.01,P<0.05),表现为促进性的即刻效应,2 mA电针具有后效应;而正常+6 mA组大鼠电针过程中远端结肠蠕动波曲线下面积和平均幅值较电针前降低(P<0.001),呈现出抑制性的即刻效应。多次电针干预结束后,与电针前比较,便秘+2 mA组大鼠电针过程中结肠蠕动波曲线下面积和平均幅值升高(P<0.05,P<0.01),腹泻+6 mA组大鼠电针过程中结肠蠕动波曲线下面积和平均幅值降低(P<0.01,P<0.05);便秘+2 mA组大鼠结肠蠕动波曲线下面积高于便秘组(P<0.001),腹泻+6 mA组大鼠结肠蠕动波曲线下面积低于腹泻组(P<0.001);电针对便秘+2 mA组大鼠结肠动力的促进效应强于正常+2 mA组(P<0.05),电针的抑制效应在正常+6 mA组和腹泻+6 mA组大鼠间的差异无统计学意义(P>0.05)。远端结肠局部ENS中,2 mA电针激活VAChT阳性神经元的比例高于其激活n NOS阳性神经元的比例(P<0.001),而6 mA电针则以激活nNOS阳性神经元为主(P<0.001)。结论:功能性便秘和腹泻模型状态下,大鼠体表敏化区集中分布于T10-L3节段的下腹部和下背部区域。电针“天枢”对远端结肠运动具有双向调节作用,该效应与电针强度相关,且可能由不同亚型的ENS神经元介导完成。
2025年04期 v.45;No.439 460-472页 [查看摘要][在线阅读][下载 1899K] [下载次数:442 ] |[网刊下载次数:0 ] |[引用频次:0 ] |[阅读次数:1 ] - 李泐;王强;刘隽阳;赵蔚佳;曾佳玮;张兵兵;茂瑞瑞;冯卫星;李杰;
目的:观察“嗅三针”对血管性痴呆(VD)模型大鼠认知、学习记忆能力及海马小胶质细胞(MG吞噬活性的影响,探讨针刺调节MG活化及髓鞘再生改善VD的机制。方法:从38只符合实验要求的SD大鼠中随机选取9只作为假手术组,其余大鼠采用永久性双侧颈动脉结扎法制备VD模型,造模成功的18只大鼠随机分为模型组、电针组,每组9只。电针组大鼠选取“嗅三针”(“印堂”及双侧“迎香”)进行电针干预,予疏密波,频率为2 Hz/15 Hz,电流1 mA,每次15 min,每日1次,7 d为一疗程,疗程间休息2 d,共2个疗程。采用新物体识别实验观察大鼠认知能力,Morris水迷宫实验观察大鼠学习记忆能力,LFB染色观察大鼠海马区髓鞘脱失情况,Western blot法检测大鼠海马区髓系细胞触发受体2(TREM2)、髓鞘蛋白脂质蛋白(PLP)蛋白表达,免疫荧光法检测大鼠海马PLP、性别决定区Y框蛋白10(SOX10)、离子钙结合适配器分子1(Iba1)+TREM2+、Iba1+溶酶体关联膜蛋白1(LAMP1)+阳性表达。结果:与假手术组比较,模型组大鼠第3、4天逃避潜伏期延长(P<0.05,P<0.01),总路程增加(P<0.01),认知指数(RI)、穿越平台次数降低(P<0.01);与模型组比较,电针组大鼠第3、4天逃避潜伏期缩短(P<0.05),总路程减少(P<0.01),穿越平台次数、RI升高(P<0.05,P<0.01)。与假手术组比较,模型组大鼠海马CA1区染色不均匀,髓鞘纤维排列稀疏,轮廓不清晰,出现较多空泡样改变;与模型组比较,电针组大鼠海马CA1区染色加深,髓鞘纤维增多、排列整齐,空泡样改变减少。与假手术组比较,模型组大鼠海马TREM2蛋白表达升高、PLP蛋白表达降低(P<0.01);与模型组比较,电针组大鼠海马TREM2、PLP蛋白表达升高(P<0.01,P<0.05)。与假手术组比较,模型组大鼠海马PLP、SOX10、Iba1+LAMP1+阳性表达降低(P<0.05,P<0.01),Iba1+TREM2+阳性表达升高(P<0.05);与模型组比较,电针组大鼠海马PLP、SOX10、Iba1+TREM2+、Iba1+LAMP1+阳性表达升高(P<0.05,P<0.01)。结论:“嗅三针”能够改善VD大鼠认知能力和学习记忆能力,其机制可能为上调TREM2、LAMP1,调节MG吞噬活性及胞内降解能力,促进髓鞘再生。
2025年04期 v.45;No.439 473-481页 [查看摘要][在线阅读][下载 1630K] [下载次数:464 ] |[网刊下载次数:0 ] |[引用频次:0 ] |[阅读次数:1 ] - 郝健亨;段杨静;常博雅;任佳;郝日雯;王海军;冀来喜;
目的:观察“秩边透水道”针法对卵巢低反应(POR)小鼠生殖功能的影响,探析针刺改善POR小鼠体外受精-胚胎移植(IVF-ET)后早期胚胎的分子机制。方法:从70只雌性C57BL/6小鼠中筛选出60只动情周期规律的小鼠,其中30只随机分为空白组、模型组和针刺组,每组10只。模型组和针刺组小鼠给予雷公藤多苷混悬液(50 mg·kg-1·d-1)灌胃2周制备POR模型,空白组给予等体积的0.9%氯化钠溶液灌胃。造模成功后,针刺组给予“秩边透水道”针法干预,每日1次,每次20 min,连续2周。干预结束后,各组小鼠同时进行促排卵操作,并眼眶取血、摘取卵巢、获取新鲜裸卵。将经过孵育的裸卵和从15只雄性C57BL/6小鼠获取的精子,通过IVF-ET的方式分别移植到另外30只C57BL/6供体假孕雌鼠输卵管内,移植第7日获取着床胚胎组织。造模后和干预后,观察各组小鼠一般情况,比较各组小鼠动情周期紊乱率;干预后,观察各组小鼠获卵数、卵巢湿重与卵巢指数,ELISA法检测各组小鼠血清抗缪勒管激素(AMH)、卵泡刺激素(FSH)、黄体生成素(LH)、雌二醇(E2)含量,HE法和透射电镜观察各组小鼠卵巢形态和线粒体超微结构,采用转录组测序技术筛选各组小鼠早期胚胎的差异表达基因(DEG)并进行生物信息学分析,实时荧光定量PCR法对差异显著的回调DEGs进行验证。结果:干预后,与空白组比较,模型组小鼠精神较差,进食量和饮水量减少,活动减少;动情周期紊乱率升高(P<0.01);获卵数、卵巢湿重和卵巢指数降低(P<0.01);血清AMH和E2含量降低(P<0.01),血清FSH和LH含量升高(P<0.01);卵巢组织内闭锁卵泡增多,颗粒细胞排列层次紊乱,线粒体数量减少、出现空泡和内嵴断裂现象。与模型组比较,针刺组小鼠精神改善,进食和活动增加;动情周期紊乱率降低(P<0.01);获卵数、卵巢湿重和卵巢指数升高(P<0.01,P<0.05);血清AMH和E2含量升高(P<0.01),血清FSH和LH含量降低(P<0.01);卵巢组织内闭锁卵泡减少,各级卵泡数量增加,线粒体数量增加、空泡和内嵴断裂现象减少。在空白组vs模型组和模型组vs针刺组之间共筛选到258个交集DEGs,194个交集DEGs在干预前后出现回调趋势,其中地塞米松诱导的Ras相关蛋白1(Rasd1)、乳腺癌中雌激素调控基因1(Greb1)、含亮氨酸重复序列的G蛋白偶联受体6(Lgr6)、弗雷泽综合征1(Fras1)、载脂蛋白D(Apod)是差异表达最显著的5个回调DEGs。与空白组比较,模型组小鼠胚胎Rasd1、Greb1、Lgr6、Fras1和Apod mRNA表达水平降低(P<0.01,P<0.05);与模型组比较,针刺组小鼠胚胎Rasd1、Greb1、Lgr6、Fras1和Apod mRNA表达水平升高(P<0.05,P<0.01),与DEGs筛选结果一致。基因本体(GO)分析显示共表达回调基因主要参与肌母细胞分化、心内膜垫发育、心脏形态发生等生物过程;京都基因与基因组百科全书(KEGG)分析显示共表达回调基因主要富集于Wnt信号通路上,同时与多种类型的心肌疾病有关。结论:“秩边透水道”针法可以改善POR小鼠卵巢低反应,促进卵泡正常发育和排出,进而提高早期胚胎的质量,降低胚胎心脏等器官发育缺陷和畸形的风险,其潜在机制可能与通过Wnt信号通路调控胚胎关键基因的表达模式有关。
2025年04期 v.45;No.439 482-494页 [查看摘要][在线阅读][下载 2037K] [下载次数:388 ] |[网刊下载次数:0 ] |[引用频次:0 ] |[阅读次数:1 ] - 王文;韩凌;梁仪春;梁树麟;覃湛;耿立果;何超拔;黄婷;袁少英;
目的:观察不同频率电针对少弱精子症(OAT)模型大鼠生精功能、睾丸形态及氧化应激的影响,探索电针干预OAT的作用机制及最优参数。方法:将60只SPF级雄性SD大鼠随机分为溶剂对照组、模型组、2 Hz电针组、100 Hz电针组和2 Hz/100 Hz电针组,每组12只。除溶剂对照组外,其余4组大鼠以奥硝唑混悬液(800 mg·kg-1·d-1)灌胃28 d的方法制备OAT模型。从造模第1天开始,3个电针组均于“关元”“气海”及双侧“三阴交”“足三里”行电针干预,2 Hz电针组、100 Hz电针组、2 Hz/100 Hz电针组分别选择2 Hz连续波、100 Hz连续波和2 Hz/100 Hz疏密波,电流1~3 mA,每次30 min,隔日1次,连续28 d。干预后,计算各组大鼠睾丸指数,检测附睾精子质量,观察大鼠生育能力;HE染色法观察大鼠睾丸组织形态并计算Johnson评分;免疫荧光法检测大鼠睾丸组织活性氧(ROS)阳性表达;ELISA法检测大鼠睾丸组织氧化应激指标超氧化物歧化酶(SOD)、过氧化氢酶(CAT)活性及丙二醛(MDA)含量;Western blot法检测大鼠睾丸组织核因子红细胞2相关因子2(Nrf2)及血红素加氧酶-1(HO-1)蛋白表达。结果:与溶剂对照组比较,模型组大鼠睾丸指数、精子浓度、精子活力及产仔数降低(P<0.01);生精小管萎缩,Johnson评分降低(P<0.01);睾丸组织SOD及CAT活性、Nrf2及HO-1蛋白表达降低(P<0.01);精子畸形率及睾丸组织ROS阳性表达、MDA含量升高(P<0.01)。与模型组比较,2 Hz电针组、100 Hz电针组及2 Hz/100 Hz电针组大鼠睾丸指数、精子浓度、精子活力及产仔数升高(P<0.05,P<0.01);睾丸组织病理形态改善,Johnson评分升高(P<0.01);睾丸组织SOD及CAT活性、Nrf2及HO-1蛋白表达升高(P<0.05,P<0.01);精子畸形率及睾丸组织ROS阳性表达、MDA含量降低(P<0.05,P<0.01)。与2 Hz电针组比较,2 Hz/100 Hz电针组大鼠睾丸指数、精子浓度、精子活力及睾丸组织CAT活性、HO-1蛋白表达升高(P<0.01,P<0.05),睾丸组织ROS阳性表达降低(P<0.01);与100 Hz电针组比较,2 Hz/100 Hz电针组大鼠睾丸指数升高(P<0.01),睾丸组织ROS阳性表达降低(P<0.01)。结论:2 Hz低频连续波、100 Hz高频连续波、2 Hz/100 Hz疏密波电针均可改善OAT模型大鼠生精功能障碍,降低睾丸组织氧化应激水平,其机制可能与上调Nrf2、HO-1蛋白表达,改善氧化应激有关,其中2 Hz/100 Hz疏密波电针效果最优。
2025年04期 v.45;No.439 495-504页 [查看摘要][在线阅读][下载 1709K] [下载次数:351 ] |[网刊下载次数:0 ] |[引用频次:0 ] |[阅读次数:1 ]